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武汉赛尔夫科技有限公司
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色谱法分类
按两相的物理状态可分为:气相色谱法(gc)和液相色谱法(lc)。气相色谱法适用于分离挥发性化合物。gc根据固定相不同又可分为气固色谱法(gsc)和气液色谱法(glc),其中以glc应用广。液相色谱法适用于分离低挥发性或非挥发性、热稳定性差的物质。lc同样可分为液固色谱法(lsc)和液液色谱法(llc)。此外还有超临界流体色谱法(sfc),它以超临界流体(界于气体和液体之间的一种物相)为流动相(常用co2),因其扩散系数大,能很快达到平衡,故分析时间短,-适用于手性化合物的拆分。等所有问题解决后,将色谱柱出口从瓶中取出,-柱端口无溶剂残留,再进行下一步的安装。
按原理分为吸附色谱法(ac)、分配色谱法(dc)、离子交换色谱法(iec)、排阻色谱法(ec,又称分子筛、凝胶过滤(gfc)、凝胶渗透色谱法(gpc)和亲和色谱法。(此外还有电泳。)
按操作形式可分为纸色谱法(pc)、薄层色谱法(tlc)、柱色谱法。
随着柱填料的快速发展,反相色谱法的应用范围逐渐扩大,现已应用于某些无机样品或易解离样品的分析。为控制样品在分析过程的解离,常用缓冲液控制流动相的ph值。但需要注意的是,c18和c8使用的ph值通常为2.5~7.5(2~8),太高的ph值会使硅胶溶解,太低的ph值会使键合的脱落。有报告新商品柱可在ph 1.5~10范围操作。为了加快分离的时间与提高分离的效率,制备色谱的的进样品量很大,导致制备色谱柱子的分离负荷的相应加大,也就必须加大色谱柱填料,增大制备色谱的直径和长度,使用的相对多的流动相。
正相色谱法与反相色谱法比较表
正相色谱法 反相色谱法
固定相极性 高~中 中~低
流动相极性 低~中 中~高
组分洗脱次序 极性小先洗出 极性大先洗出