反相色谱中样品的保留值主要由固定相比表面积、键合相种类和浓度决定，保留值通常随链长增长或键合相的疏水性增强而增大．对于非极性化合物通常遵循以下规则：(弱)非键合硅胶《基
一般来说，涂有极性固定相和较厚涂层的色谱柱老化时间长，而弱极性固定相和较薄涂层的色谱柱所需时间较短。而plot色谱柱的老化方法有各不相同。不要使用超声清洗溶剂入口过滤头，否则玻璃颗粒可能是破碎造成堵塞。 plot柱的老化步骤:hlz pora 系列 250℃， 8小时以上molesieve分子筛 300℃ 12小时alumina氧化铝 200℃ 8小时以上由于水在氧化铝和分子筛plot柱中的不可逆吸附，使得这两种色谱柱容易发生保留行为漂移。当柱子分离过含有高水分样品后，需要将色谱柱重新老化，以除去固定相中吸附的水分。设置确认载气流速对于 毛细管色谱柱，载气的种类高纯度氮气或氢气。载气的纯度大于99.995%，而其中的含氧量越少越好。如果您使用的是 毛细管色谱柱，那么依照载气的平均线速度cm/sec,而不是利用载气流量ml/min来对载气做出评价。因为柱效的计算采用的是载气的平均线速度。平均线速度值：氮气：10-12cm/sec 氢气：20-25cm/sec载气杂质过滤器在载气的管线中加入气体过滤装置不仅可以延长色谱柱寿命，而且很大程度的降低了背景噪音。建议安装一个高容量脱氧管和一个载气净化器。使用ecd系统时，能在其辅助气路中也安装一个脱氧管。
液相色谱仪是一种非常-的分析仪器，气主要采用液相色谱法，是一种使用液体当做流动相的色谱仪器，在当今涉及到多个行业领域，液相色谱仪应用范围非常广。
液相色谱仪是色谱仪器之一，刚才我们也说到了，它是亿液体为流动相进行分析。色谱柱是进行色谱分析的主要仪器，色谱柱的正确安装才能-发挥其的性能和延长使用寿命。液相色谱仪采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。它的主要特点有高速、高压、高灵敏度，液相色谱仪比传统的液相色谱仪速度要快、灵敏度也高、色谱柱可以反复使用、分辨率-等，所以现在很多都选择液相色谱仪。
液相色谱仪的应用范围非常广，现在涉及多个领域，已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等科学科领域中重要的分离分析技术。
色谱柱中的流动相会排干吗？ 不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，hplc系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱？泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了？色谱柱还能使用吗？事实上，如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干，并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气，泵也不会将空气排入色谱柱。plot柱的老化步骤:hlzpora系列250℃，8小时以上molesieve分子筛300℃12小时alumina氧化铝200℃8小时以上由于水在氧化铝和分子筛plot柱中的不可逆吸附，使得这两种色谱柱容易发生保留行为漂移。因为泵只能输送液体，而不能输送空气。相比之下，另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样，整个色谱柱干涸的情况不太容易发生，多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了，因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。即使色谱柱真的变干了，也不一定就不可救药了。可以尝-一种完全脱气的、表面张力低的溶剂冲洗色谱柱以除去气体。较低的表面张力有助于浸润填料表面；已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。色谱柱大约需要冲一个小时或更多的时间被-浸润，恢复到正常状态。
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